大和の国葛城山に住みつき天下を各乱しようと狙っている土蜘蛛の精魂は、胡蝶という美しい次女に身を変え、典薬守からの使いと偽って病気の「源頼光」に飲ませる薬に毒を盛って差し出す。
倒れた「頼光」を見て、念願を果たさんとばかりに襲いかかるが、逆に「頼光」によって伝家の宝刀・膝丸で一太刀浴びせられ、精魂の正体も見破られ葛城山へと逃げ込む。
そこで「頼光」は、我が身を救った宝刀膝丸の剣を蜘蛛切り丸と新ため、四天王にこの刀を授け土蜘蛛征伐を命じる。
「卜部六郎季武」と「坂田金時」は土蜘蛛のくり出す妖術と応戦しながらついに精魂を退治する。